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ADPG焦磷酸化酶（AGP）測(cè)試盒微量法

更新時(shí)間：2021-04-29      瀏覽次數(shù)：1594

ADPG焦磷酸化酶(AGP）測(cè)試盒微量法
測(cè)定意義：AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中，催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應(yīng)生成淀粉合成的直接前體ADPG，是植物淀粉生物合成的主要限速步驟

測(cè)定原理：AGP催化的逆向反應(yīng)生成G1P，在反應(yīng)體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下測(cè)定NADPH增加速率，即可計(jì)算AGP活性。

需要的儀器，耗材:紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

ADPG焦磷酸化酶(AGP）測(cè)試盒微量法
樣本處理
稱(chēng)取約 0.1g 組織加入 1mL 提取液，冰浴中勻漿。10000g ，4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。
 

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